Milieu TCBS

Plaque de gélose TCBS de Vibrio cholerae (à gauche) et Vibrio parahaemolyticus (à droite) cultivés par le département de microbiologie de la faculté de médecine de l'université de Srinakharinwirot (Bangkok, Thaïlande).

Le milieu TCBS (ou Gélose TCBS ou milieu Thiosulfate Citrate Bile Saccharose) est un milieu de culture et d'isolement sélectif des bactéries du genre Vibrio.

Description

Le milieu TCBS a été créé par Kobayshi en 1963 par une modification du milieu de Nakanishi[1],[2]. Il est aussi appelé gélose TCBS[3] ou milieu Thiosulfate Citrate Bile Saccharose[4]. C'est un milieu de culture qui permet l’isolement sélectif des vibrions entéropathogènes de par sa forte concentration en bile et en citrate associée à un pH élevé[1],[5]. Dans ces conditions, Vibrio cholerae et Vibrio parahaemolyticus se cultivent bien. L'espèce Vibrio cholerae qui est saccharose +, forme des colonies jaunes en 24h à 37°C[5],[3]. La croissance des entérocoques et des entérobactéries n’est cependant que ralentie[5]. Les colonies de Vibrio, saccharose+ et H2S– apparaissent jaunes sans centre noir.

Le milieu TCBS est toutefois moins efficace que le milieu MSA-B pour dénombrer les Vibrio totales[2].


Composition

(Formule en g/L d'eau distillée)[1],[2] 

- Peptone...................................... 10
- Extrait de levure............................  5
- Citrate de sodium............................ 10
- Thiosulfate de sodium........................ 10
- Chlorure de sodium........................... 10
- Bile de bœuf.................................  8
- Citrate ferrique.............................  1
- Saccharose................................... 10 à 20
- Bleu de bromothymol..........................  0,04
- Bleu de thymol...............................  0,04
- Agar......................................... 14

pH final ~ 8,6

Caractéristiques

  • Base nutritive enrichie par des extraits de levure.
  • Forte concentration d'inhibiteurs :
    • citrate de sodium
    • thiosulfate de sodium
    • bile de bœuf dont la fonction est d'inhiber les bactéries à gram positif[3]
  • Deux critères de différenciation :
    • fermentation du saccharose (révélé par les indicateurs de pH),
    • production d'H2S à partir du thiosulfate de sodium (révélé par le citrate ferrique).
  • NaCl à concentration favorable pour les Vibrio.
  • Le pH alcalin qui renforce l'effet sélectif et favorise la croissance des bactéries du genre Vibrio[3]
  • Couleur finale du milieu : verte

Mode de lecture

La fermentation du saccharose se traduit par un virage au jaune de la colonie[5],[3].

  • Colonie jaune : bactérie saccharose +
    • Les colonies deviennent jaunes grâce à l'acidification du milieu par fermentation du saccharose => saccharose +
    • c'est le cas de Vibrio cholerae, Vibrio fluvialis, Vibrio alginolyticus et Vibrio anguillarum[5]
  • Colonie verte : bactérie saccharose -
    • Ces colonies restent bleues ou vertes car il n'y a pas d'acidification du milieu sans fermentation du saccharose

La production d'H2S se décèle grâce au noircissement du centre de la colonie[3].

  • Colonie à centre noir : H2S +
    • les bactéries capables de former de sulfure d’hydrogène à partir de thiosulfate de sodium ont un centre noir et sont H2S +
  • Colonie sans centre noir : H2S –
    • incapables de former du sulfure d'hydrogène, ces bactéries n'auront pas de centre noir sur leurs colonies et sont H2S –

Indications

Les bactéries du genre Vibrio, contrairement aux autres bactéries, se développent facilement sur ce milieu sans jamais produire d'H2S. Vibrio cholerae se repère grâce à ses colonies jaunes.

Notes et références

  • Cet article est partiellement ou en totalité issu de l'article intitulé « Thiosulfate Citrate Bile Saccharose » (voir la liste des auteurs).
  1. ↑ a b et c (ja) T Kobayashi, S Enomoto, R Sakazaki et S Kuwahara, « A new selective isolation medium for the Vibrio group » [« A new selective isolation medium for the Vibrio group; on a modified Nakanishi's medium (TCBS agar medium) »], Nihon Saikingaku Zasshi, vol. 18,‎ , p. 387-92 (DOI 10.3412/jsb.18.387.)
  2. ↑ a b et c (en) Nicky B. Buller, « TCBS cholera medium (TCBS) », dans Bacteria and Fungi from Fish and Other Aquatic Animals, CABI, , 881 p. (ISBN 9781845938055)
  3. ↑ a b c d e et f « Gélose TCBS », sur Microbiologie Médicale
  4. ↑ (en) G.D.W. Curtis, J.E.L. Corry et R.M. Baird, « 5. Plating agars for Vibrio cholerae », dans Culture Media for Food Microbiology, Elsevier Science, , 490 p. (ISBN 9780080530123)
  5. ↑ a b c d et e Denis et et al 2016, p. 328.

Voir aussi

Bibliographie

  • François Denis, Marie-Cécile Ploy, Christian Martin et Vincent Cattoir (ill. Carole Fumat), Bactériologie médicale : techniques usuelles, Issy-les-Moulineaux, Elsevier Masson, , 3e éd., 575 p. (ISBN 9782294746161).
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